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熒光分光光度計測試注意事項
时间:2020-10-26 点击次数:1118
  熒光分光光度計是用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光谱的一种仪器。其能提供包括激发光谱、发射光谱以及荧光强度、量子产率、荧光寿命、荧光偏振等许多物理参数,从各个角度反映了分子的成键和结构情况。熒光分光光度計具有灵敏度高、选择性强、用样量少、方法简便、工作曲线线形范围宽等优点,可以广泛应用于生命科学、医学、药学和药理学、有机和无机化学等领域。
 
  熒光分光光度計測試注意事項:
 
  ①樣品應盛在四面透光的石英比色皿(熒光池)中,如果是揮發性樣品應使用帶塞的熒光池。
 
  ②在熒光分析時,爲了得到穩定可靠的數據,一般需要開機預熱氙燈大約30min。如果儀器光源采用的是閃爍氙燈,預熱時間可以縮短到10min左右。對某些易感光、易分解的熒光物質,盡量采用長波長、低人射光強度及短時間光照。
 
  ③溫度變化可引起熒光強度的改變。通常降低溫度,有利于提高熒光量子産率,熒光強度增大。溫度影響熒光強度的顯著程度因樣品而異,大部分熒光物質的熒光強度受溫度影響不大,測試溫度變化不超過±3℃,對測試結果幾乎無影響。
 
  ④當熒光物質是弱酸或弱堿時,溶液的pH對熒光強度有較大影響。因爲弱酸或弱堿在不同酸度中,分子和離子的電離平衡會發生改變,而熒光物質的熒光強度會因其離解狀態發生改變。
 
  ⑤熒光物質分子與溶液中其它物質分子之間作用導致熒光強度降低,常見的熒光猝滅劑,如鹵素離子、重金屬離子、02、硝基化物質、重氮化合物等。溶液中的溶解氧也能引起幾乎所有的熒光物質産生不同程度的熒光熄滅現象,因此,在較嚴格的熒光實驗中必須除02。

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